Несмотря на свою относительно короткую историю, театр получил признание. Самобытные интерпретации классической музыкального наследия и современных произведений, исключительной слаженности оркестр и хор, талантливые солисты, яркие и самобытные исполнительские традиции позволили театру достичь творческих вершин и занять место в сегодняшней музыкальной культуре.
Киевская опера стала рядом с театрами Москвы и Петербурга одной из лучших в Российской империи. 8 ноября (27 октября по ст. ст.) 1867 года состоялся дебют на сцене нового театра с постановкой «Аскольдова могила» Алексея Верстовского, которая рассказывала о легендарном прошлом Киева. Дальнейшие творческие достижения киевской оперной труппы связаны, прежде всего, с деятельностью гения украинской музыки, композитора Николая Лысенко. В 1874 впервые прозвучала на украинском языке его опера «Рождественская ночь» (по режиссуре Михаила Старицкого).
16 (4 по ст.ст.) февраля 1896 после утреннего показа оперы «Евгений Онегин» П. Чайковского в театре возник пожар. Огонь распространился молниеносно, и уже через несколько часов на месте построенного в 1856 году архитектором Иваном Штромом второго городского театра остались обугленные стены.